Hình 6. Sơ đồ Cấu Tạo Của Máy Quang Phổ UV-VIS - Tài Liệu Text

1. Trang chủ >
2. Giáo án - Bài giảng >
3. Tư liệu khác >

Hình 6. Sơ đồ cấu tạo của máy quang phổ UV-VIS

Bạn đang xem bản rút gọn của tài liệu. Xem và tải ngay bản đầy đủ của tài liệu tại đây (5.18 MB, 214 trang )

- ếu máy dùng lăng kính hoặc cách tử có khả năng tạo ra ánh sánggần như đơn sắc (± 1nm).3.4.3. Mẫu đoĐựng dung dịch đo bằng cuvet. Có nhiều loại cuvet chiều dàykhác nhau. ếu đo ở vùng UV phải dùng cuvet thạch anh, nếu đo ởvùng V S có thể dùng cuvet thạch anh, thuỷ tinh, nhựa. Khi dùngcuvet lưu ý không được cầm tay hoặc làm trầy xước vào phần trongsuốt của cuvet.3.4.4. DetectơLà tên gọi chung của một loại thiết bị tiếp nhận thông tin dưới dạngmột tín hiệu nào đó (như quang, nhiệt,...) rồi chuyển hoá thành một tínhiệu tương ứng giúp người sử dụng nhận ra.rong máy đo quang phổ UV-V S, detectơ chủ yếu là tế bào quangđiện để chuyển cường độ ánh sáng thành dòng quang điện. ế bàoquang điện có nhiều loại, có thể là tế bào chân không, bán dẫn hoặc ốngnhân quang.ế bào quang điện có hiện tượng mệt mỏi, độ nhạy giảm khi phảilàm việc liên tục nên lưu ý không được chiếu ánh sáng liên tục vàotế bào quang điện.3.4.5. Bộ khuếch đạihiệm vụ chính là khuếch đại tín hiệu cho mạnh lên trước khi đưavào bộ phận ghi đo. Có thể dùng khuếch đại một chiều hoặc khuếch đạixoay chiều.3.4.6. Bộ phận ghi đouỳ theo các hãng sản xuất, có thể là máy đọc, máy ghi, máy hiệnsố, kèm máy tính,... nhờ kỹ thuật điện tử phát triển, bộ phận này ngàycàng được hoàn thiện.3.5. Các cách xác định nồng độ dung dịch trong phương pháp đoquang phổ hấp thụ UV-VIS3.5.1. Phương pháp trực tiếpkết quả nồng độ CX., E1%1cm có thể có trong bảng tra cứu (hoặc tự xác địnhtừ chất chuẩn gốc).(được kiểm tra kỹ về thang bước sóng và về độ hấp thụ).Ví dụ: Định lượng vitamin B12 trong dung dịch thuốc tiêm bằngphương pháp quang phổ hấp thụ UV-VIS.Chuẩn bị dung dịch thử từ mẫu chế phẩm như ở ví dụ phần địnhtính vitamin B12 ở trên và đo mật độ quang của dung dịch này ở bướcsóng 361nm.àm lượng vitamin B12 (mg/ ml) được tính theo công thức:rong đó:D: iá trị mật độ quang đo được của dung dịch thử vitamin B12 207:độ hấp thụ riêng (E1%1cm) của vitamin B12 ở bước sóng 361nm.n: ệ số pha loãng của dung dịch cần xác định.3.5.2. Phương pháp đường chuẩncó nồng độ biết trước C1, C2, C3, C4,C5 đem đo mật độ quang tương ứngD1, D2, D3, D4, D5. Vẽ đồ thị D - C.cần xác định CX được DX.Xdựa vào đường chuẩnxác định CX.Yêu cầu:+ Đường chuẩn phải thẳng.+ CX phải nằm trong khoảng C1Hình 7. Đồ thị biểu diễnmối quan hệcủa mật độ quang vào nồng độC5 (tức khi đo DX phải nằm trongkhoảng D D5).Ví dụ: Định lượng Fe3+ bằng phương pháp đo quang.- Nguyên tắc:Dựa vào phản ứng tạo phức màu đỏ giữa Fe3+ và CNStrường acid:Fe3+ + 3CNS = Fe(CNS)3Phức này có khả năng hấp thụ ánh sáng ở vùng khả kiến, do đócó thể dùng phương pháp đo độ hấp thụ ở vùng khả kiến để địnhlượng Fe3+.- Dụng cụ và hoá chất:+ Máy quang phổ UV-V S (có thể dùng một máy đo quang kèm bộkính lọc màu).+ Pipet chính xác.+ Bình định mức 25 ml.+ Cốc thuỷ tinh.+ Ống so màu.+ Dung dịch FeCl3 0,01M (hoặc Fe( 3)3 0,01M).+ Dung dịch KC S 0,1M.+ Dung dịch Cl 10%.+ Dung dịch Fe3+ cần định lượng: dung dịch X (bình 7) để tiến hànhtheo phương pháp nhìn mắt, so sánh; dung dịch Y (bình 8) để tiếnhành theo phương pháp đường chuẩn.- Tiến hành:+ Chuẩn bị dãy dung dịch theo bảng sau:Bảng 4. Bố trí dung dịch chuẩn bị định lượng Fe3++ Phương pháp so màu bằng mắt:Lấy 6 ống so màu (ống giống nhau), đánh số từ 1 đến 6. Đổdung dịch từ các bình 2, 3, 4, 5, 6 vào các ống từ 1 đến 5 tươngứng. Ống 6 đổ dung dịch cần xác định ở bình thứ 7 vào. So sánhcường độ màu của ống số 6 xem gần bằng (hoặc bằng) màu ốngnào (hay ở giữa hai ống nào). ừ đó tính được nồng độ của dungdịch Fe3+.+ Phương pháp so sánh mật độ quang:* Chọn bước sóng (hoặc chọn kính lọc màu):Dựa trên nguyên tắc các cặp tia sáng phụ nhau, cho nên với dungdịch đo có màu đỏ (ứng với bước sóng 630 – 760nm) sẽ đo mật độquang D ở màu vàng lục cam (ứng với bước sóng 450 – 570nm). Đểchọn được bước sóng (hoặc kính lọc màu) thích hợp, ta làm như sau:dịch này trong khoảng từ 450 – 670nm và xác định cực đại hấp thụ). Đo độ hấp thụ của các dung dịch định lượng ở bước sóng này.maxđem đo mật độ quang của hai dung dịch này (mẫu trắng là dung dịch ởbình 1) ở các bước sóng từ 450nm – 570nm bằng các kính lọc. Ứngvới mỗi kính lọc, với hai dung dịch ta được hai giá trị mật độ quangtương ứng D1 và D2– D1 ở các điểm đo đó. Kính lọc nào cho2thì chính là kính lọc màu thích hợp dùng cho định lượng.max* Đo mật độ quang của dung dịch từ bình 2 đến bình 6 ở bước sónghoặc kính lọc đã xác định được ở trên với mẫu trắng là dung dịch ởbình 1.* Lập đường chuẩn biểu diễn mối quan hệ giữa mật độ quang D1, D2,D3, D4, D5 của 5 bình 2, 3, 4, 5, 6 ở trên. Vẽ đồ thị sự phụ thuộc của D vànồng độ Fe3+.* Đo mật độ quang Dy của dung dịch Y (bình số 8), dựa vào đườngchuẩn đã vẽ suy ra nồng độ Cy của Fe3+ trong dung dịch Y.3.5.3. Phương pháp so sánh0D0:.C0.lđo như với dung dịch chuẩn):DxCx cần xác định (cùng điều kiện.Cx.lừ đó tính được+ Dung dịch phải tuân theo định luật Lambert – Beer.+ C0 và Cx khác nhau không nhiều (thường ± 10%).Ví dụ: Định lượng novocain bằng phương pháp chiết đo quang- Nguyên tắc:ovocain là một bazơ tổng hợp, có khả năng tạo cặp ion màu vớimột số chất acid (ví dụ màu azoin như da cam methyl, tropeolinOO,...).rong môi trường dung dịch đệm acetat (có p = 4 - 5) novocain ở dướidạng cation (B+) và acid màu như da cam methyl ở dưới dạng anion (A-)tạo thành cặp ion B+A- có màu chiết được vào cloroform:B+: dạng cation của ancaloid, base tổng hợp.AB+AĐể định lượng, lấy lớp cloroform đem đo mật độ quang ở bước sóng420nm.- Dụng cụ, hoá chất:+ Buret.+ Pipet chính xác các loại.+ Bình gạn 50 ml.+ Bình định mức 25 ml.+ Cốc thuỷ tinh.+ Phễu lọc, giấy lọc.+ Ống nghiệm to.+ Dung dịch novocain chuẩn 1mg/ ml (0,1%).+ Dung dịch tiêm novocain để định lượng (khi dùng phải tính phaloãng để có nồng độ gần chuẩn).+ Dung dịch đệm acetat (p = 4,20).+ Dung dịch da cam methyl 0,1%.+ Cloroform.+ Máy quang phổ UV-VIS.- Tiến hành:Cho vào 5 bình gạn các chất theo bảng sau:Bảng 5. Bố trí dung dịch chiết định lượng novocainChiết các bình với C Cl3 bằng cách lắc nhẹ 5 phút (làm 3 lần,mỗi lần 6 ml CHCl3). ộp dịch chiết C Cl3 (3 lần) của từng bình gạnvào từng bình định mức 25 ml tương ứng, thêm C Cl3 vào từngbình cho đến vạnh, lắc đều. Lọc qua giấy lọc khô vào các ốngnghiệm to tương ứng (sạch và khô).Đo mật độ quang D của các dịch lọc (trong ống nghiệm) ở bướcsóng 420nm với mẫu trắng là dịch chiết của bình S0.ính kết quả theo phương pháp so sánh:rong đó:Cx: nồng độ dung dịch novocain cần định lượng (mg/ml). Cch: nồng độ dung dịch novocain chuẩn (mg/ ml).: mật độ quang trung bình của bình X1 và X2.: mật độ quang trung bình của bình S1 và S.2Chú ý: Khi đo mật độ quang của dịch chiết không được sử dụngcuvet nhựa.3.5.4. Phương pháp thêmx.Cx.lmật độ quang Dx + t.(Cx + Ct).l.tcần xác định được Dxvào dung dịch cần xác định và đoừ đó tính đượcdịch tuân theo định luật Lambert - Beer và Ct ± 10%Cx). Phương phápnày có ưu điểm loại trừ được một số yếu tố ảnh hưởng có cùng trongdung dịch (hoặc trong mẫu phân tích) mà ta chưa biết.Ví dụ: Định lượng Berberin trong viên nén Berberin theo phươngpháp thêm.- Nguyên tắc:Dung dịch Berberin trong nước có cực đại hấp thụ ánh sáng ở bướcsóng 263nm và 345nm, vì thế có thể áp dụng phương pháp đo quangđể định lượng berberin. hưng vì trong viên nén, thành phần phức tạp,ngoài berberin còn có tá dược, do đó có thể dùng phương pháp thêmđể khắc phục được một số yếu tố ảnh hưởng.

Xem Thêm

Tài liệu liên quan

• GIAO TRINH KIEM NGHIEM
  • 214
  • 16,633
  • 42
• Tài liệu Thông tư liên tịch số 32/2007/TTLT-BLĐTBXH-TLĐLĐVN docx
  • 9
  • 0
  • 0
• Tài liệu Chỉ thị số 20-CT/TW pptx
  • 3
  • 0
  • 0
• Tài liệu Quyết định số 09/QĐ-TTg về việc phong tặng danh hiệu chiến sĩ thi đua toàn quốc do Thủ tướng Chính phủ ban hành pdf
  • 1
  • 0
  • 0
• Tài liệu Quyết định số 08/QĐ-TTg về việc tặng thưởng cờ thi đua của Chính phủ do Thủ tướng Chính phủ ban hành pdf
  • 1
  • 0
  • 0
• Tài liệu Quyết định số 44/2008/QĐ-TTg pdf
  • 12
  • 0
  • 0
• Tài liệu Quyết định số 328/QĐ-TTg docx
  • 2
  • 0
  • 0
• Tài liệu Thông báo số 114/TB-BGTVT doc
  • 2
  • 0
  • 0
• Tài liệu Quyết định số 1150/QĐ-BYT docx
  • 3
  • 0
  • 0
• Tài liệu Quyết định số 609/QĐ-TLĐ pdf
  • 3
  • 0
  • 0
• Tài liệu Quyết định số 11/2008/QĐ-UBND docx
  • 8
  • 0
  • 0

Tải bản đầy đủ (.docx) (214 trang)

Tài liệu bạn tìm kiếm đã sẵn sàng tải về

(3.82 MB) - GIAO TRINH KIEM NGHIEM-214 (trang) Tải bản đầy đủ ngay ×