Phương Pháp Phân Tích Tế Bào Máu Ngoại Vi Trên Công Nghệ

Tư vấn Liên hệ BỆNH VIỆN ĐA KHOA ĐỨC GIANG Chăm sóc sức khỏe của bạn là hạnh phúc của chúng tôi 54 Trường Lâm, Phường Đức Giang, Long Biên, Hà NộiToggle navigation

• Trang chủ
• Giới thiệu
  • Giới thiệu chung
  • Lịch sử hình thành và phát triển
  • Chức năng và nhiệm vụ
  • Thành tựu đạt được
  • Cơ cấu tổ chức
  • Lĩnh vực hoạt động & nghiên cứu
  • Sơ đồ trong bệnh viện
  • Lãnh đạo bệnh viện qua các thời kỳ
• Khoa phòng
• Tin tức
  • Hoạt động bệnh viện
  • Thông tin chuyên môn
  • Hội nghị, hội thảo
  • Thi đua & công đoàn
  • Thông tin mua sắm - đầu tư
• Dịch vụ
  • Trả kết quả online
  • Đăng ký khám bệnh qua tổng đài
  • Phòng Tiêm chủng
• Thông tin dược lâm sàng
• Đào tạo - Hợp tác
• Vắc Xin Covid 19
  • Thông tin chung
  • Hỏi và đáp
  • Hộ chiếu vắc xin
• Từ thiện
• Tuyển dụng
  • Lời ngỏ
  • Chính sách nhân sự
  • Tin tuyển dụng

Trang chủ / Bệnh viện ĐỨC GIANG / Thông tin khoa họcThông tin khoa họcPhương pháp phân tích tế bào máu ngoại vi trên công nghệ laser hoàn toàn

Bệnh viện Đa khoa Đức Giang ngày càng phát triển về khả năng cung cấp các dịch vụ xét nghiệm hiện đại, chính xác và tin cậy cho các khách hàng. Năm 2017 khoa Huyết học- Truyền máu đề ra mục tiêu thực hiện xét nghiệm tế bào máu ngoại vi trên hệ hống máy xét nghiệm theo nguyên lý laser hoàn toàn, chứ không phải là công nghệ bán laser như các máy đang thực hiện. Là một trong những dòng máy cao cấp và hiện đại nhất, các máy xét nghiệm tế bào của khoa sắp triển khai trong năm 2017 hoàn toàn đáp ứng được yêu cầu đó, nhưng không phải ai cũng hiểu các thông số đo trong máy laser hoàn hoàn phân tích để ra các thông số như thế nào.

Tôi xin khai quát nguyên lý của máy laser hoàn toàn như sau:1. Nguyên tắc phân tích Hồng Cầu (RBC) RBC trước tiên được xử lý cầu hóa đẳng thể tích (isovolumetrically sphered) bằng SDS và cố định bằng Glutaraldehyde nhằm loại trừ sai sót có thể có do những tư thế khác nhau của hồng cầu khi đi ngang điểm đo. Sau khi xử lý, hồng cầu (và cả tiểu cầu) được đổi thành một hình cầu có cùng thể tích như ban đầu, nhưng có thể đo trong mọi tư thế mà vẫn phản ảnh đúng thể tích hồng cầu (red cell volume).Khi đi ngang điểm đo (flowcell), xử dụng nguồn sáng là laser diod 670nm, và phân tích tán xạ (scattered light) ở hai góc : góc hẹp (2-3o) phản ảnh kích thước vật thể - tức là thể tích hồng cầu (CV : Cell Volume), và góc rộng (5-15o) phản ảnh hàm lượng hemoglobin trong hồng cầu (CH : Cell Hemoglobin). Tín hiệu thu được trên mỗi góc là một cặp dữ liệu liên quan đến mỗi hồng cầu đi ngang qua điểm đo (nguyên tắc khảo sát từng tế bào – cell-by-cell) và được đánh dấu trên biểu đồ theo lý thuyết Mie. Thông qua dữ liệu ghi nhận được, sẽ đưa ra được các thông số về hồng cầu như sau :- RBC (số lượng hồng cầu) : dựa trên tổng số tín hiệu đếm được trong ngưỡng quy định.- CV và CH- HC (nồng độ hemoglobin hồng cầu, tính bằng g/dL) = CH / CV- HCT (khối thể tích hồng cầu) : là kết quả dựa trên tổng các CV.- MCV (thể tích trung bình hồng cầu) : trung bình cộng của các CV.- MCH (hàm lượng hemoglobin trung bình hồng cầu) : là kết quả dựa trên tổng các CH.- CHCM (tương đương MCHC) : trung bình cộng của các CH.- RDW (độ phân bố thể tích hồng cầu)- HDW (độ phân bố nồng độ hemoglobin)- CHDW (độ phân bố hàm lượng hemoglobin)Đặc biệt lưu ý là 3 thông số MCV, MCH và CHCM là các thông số đo trực tiếp, chứ không tính toán dựa trên hemoglobin như đa số các hệ thống huyết học dùng nguyên tắc kháng trở điện.Ngoài biểu đồ RBC chính trình bày sự phân bố và tương quan các yếu tố CH và CV, còn có các biểu đồ trình bày sự phân bố của CV, CH và HC. Trên biểu đồ chính sẽ thể hiện sự xếp loại các tế bào theo tiêu chuẩn :- Micro (hồng cầu nhỏ): khi CV < 60 fL- Macro (hồng cầu to): khi CV > 120 fL- Hypo (hồng cầu nhược sắc): Khi CH < 28 G/dL- Hyper (hồng cầu ưu sắc): Khi CH > 41 G/dL Đồng thời có thể xem được các thông số phụ là % số tế bào được xếp loại là micro, macro, hypo và hyper.Dựa trên các thông số % phụ này mà các cảnh báo về hình thái tế bào (morphology flag) sẽ được đưa ra khi thỏa các điều kiện quy định trước cho các loại cảnh báo này : ANISO (hồng cầu to nhỏ không đều), MACRO, MICRO, HCVAR (nồng độ hemoglobin hồng cầu không đều), HYPO, HYPER.Ngoài ra còn các cảnh báo hình thái khác liên quan đến hình dạng bất thường của hồng cầu hoặc các loại nhiễu có thể có : RBC fragments (mảnh vỡ hồng cầu), RBC Ghosts (bóng ma hồng cầu), NRBC (hồng cầu nhân). Ghi chú : các ngưỡng quy định cho cảnh báo hình thái đều có thể thay đổi được do người xử dụng.2. Nguyên tắc phân tích HemoglobinPhương pháp phân tích thông thường là đo quang ở bước sóng 546 nm sau khi ly giải hồng cầu bằng thuốc thử cyanmethemoglobin (hoặc thuốc thử tương đương thay thế không chứa cyanide).Điểm đặc biệt là các thông số MCH và MCHC (tính toán từ Hemoglobin đo được) được kiểm tra chéo với các thông số CH và CHCM (đo trực tiếp trên tế bào không ly giải). Hệ thống ADVIA 120 sẽ lưu ý người xử dụng khi hai số đo có sự chênh lệch quá một giới hạn nhất định và thường do một trong các nguyên nhân :- Mẫu thử có nhiều mỡ (lipidemic), bilirubin hay chilomicron, mẫu thử có số lượng bạch cầu quá cao (> 60 x 103/L), tiểu cầu bị kết cụm, mẫu thử trẻ sơ sinh… làm sai lệch kết quả đo quang.- Sự cố kỹ thuật trên một trong 2 kênh hemoglobin hoặc RBC.Lưu ý trên đây sẽ giúp người xử dụng có những biện pháp thích hợp nhằm tìm ra nguyên nhân.3. Nguyên tắc phân tích Hồng Cầu Lưới (Reticulocyte)Phương thức xử lý và phân tích tương tự như khi khảo sát hồng cầu thông thường, nhưng hồng cầu lưới được nhuộm với chất nhuộm màu nucleic acid (Oxazine 750) và khảo sát độ hấp thu chất màu này cùng trên nguồn sáng là laser diod 670nm, đối chiếu trực tiếp với kích thước và hàm lượng hemoglobin của hồng cầu lưới. Kết quả khảo sát được cho phép đưa ra được các thông số về hồng cầu lưới như sau :- Retic (Reticulocyte - hồng cầu lưới) : số lượng tuyệt đối và phần trăm % so với tổng số hồng cầu.- CHr (hàm lượng hemoglobin hồng cầu lưới).- MCVr (thể tích trung bình hồng cầu lưới).- CHCMr (nồng độ hemoglobin trung bình hồng cầu lưới). Biểu đồ Retic chính trình bày sự phân bố và tương quan của hồng cầu lưới so với hồng cầu bình thường (HC lưới có màu xanh sáng so với HC bình thường màu đỏ); biểu đồ hấp thu Oxazine 750 cho phép đánh giá chất lượng của hồng cầu lưới ở các mức L, M và H (đánh giá độ trưởng thành của HC lưới tuỳ sự hiện diện của nhân hoặc lưới RNA còn lại trong hồng cầu) cũng như các thông số phụ về % các nhóm L, M và H này. Các biểu đồ phụ trình bày sự phân bố các yếu tố CHr, CHCMr và CVr, có đối chiếu với sự phân bố của hồng cầu bình thường trên cùng thang đo cho dễ nhận định (HC lưới có màu xanh so với HC bình thường màu đỏ).4. Nguyên tắc phân tích Bạch Cầu – Kênh Basophil-Lobularity Phương thức xử lý : Dựa trên nguyên tắc được phát hiện là basophil có xu hướng đề kháng sự ly giải bởi một hổn hợp acid và chất surfactant (1) ; máu toàn phần được trộn với thuốc thử (phtaleic acid & Ssurfactant). Hồng cầu bị ly giải và tế bào chất của tất cả các loại bạch cầu khác – ngoại trừ basophil – bị loại khỏi tế bào. Hổn hợp mẫu thử được phân tích trên cùng hệ thống quang học như phân tích hồng cầu : nguồn sáng là laser diod 670nm, phân tích tán xạ góc hẹp 2-3o phản ảnh kích thước bạch cầu và góc rộng 5-15o phản ảnh độ phức tạp của nhân bạch cầu (số múi nhân). Kết quả được trình bày trên biểu đồ Baso, đối chiếu kích thước bạch cầu và độ phức tạp của nhân, xử dụng ranh giới động (tìm điểm lỏm xuống thấp nhất phân chia hai quần thể tế bào khác nhau) để ghi nhận số lượng basophil, số tế bào đơn nhân và đa nhân. 5. Nguyên tắc phân tích Bạch Cầu – Kênh Peroxidase Để bách phần đầy đủ các thành phần bạch cầu, thì thông tin của riêng kênh Basophil-Lobularity rõ ràng là chưa đủ, do đó cần phối hợp thêm một kênh phân tích khác là kênh Peroxidase.Men peroxidase hiện diện và hoạt động ở nhiều loại bạch cầu khác nhau. Dưới sự hiện diện của hydrogen peroxide và một chất màu nhận electron (khử) thích hợp, peroxidase tạo ra một chất màu đậm bên trong bạch cầu. Sự cải tiến kỹ thuật cố định tế bào cho phép phân lập rõ Monocyte khỏi nhóm Neutrophil cũng như nhóm LUC (Large Unstained Cell : các tế bào to không bắt màu), do đó kênh Peroxidase cho phép đếm chính xác 3 nhóm bạch cầu bắt màu (Neutrophil, Eosinophil và Monocyte) và 2 nhóm không bắt màu (Lymphocyte và LUC) :- Neutrophil và Eosinophil được nhận biết do có hoạt tính peroxidase rất cao, nhưng có thể phân biệt hai loại tế bào này nhờ sự khác biệt về kích thước. - Monocyte chứa một hàm lượng thấp peroxidase, nên có thể phân biệt được thành một quần thể riêng biệt, tách khỏi nhóm LUC, nhưng có thể chồng lấp một phần với một số tế bào Neutrophil chứa quá ít peroxidase.- Quần thể Lymphocyte chứa cả Lymphocyte lẫn Basophil, do đó cần phải trừ ra từ số lượng Basophil đếm được trên kênh Basophil-Lobularity. Kỹ thuật : máu toàn phần được lần lượt trộn với 3 thuốc thử. Ở bước 1 (Perox 1), hồng cầu bị ly giải và các tế bào bạch cầu được cố định. Ở bước 2 (Perox 2 và Perox 3), Neutrophil, Eosinophil và Monocyte được nhuộm màu peroxidase trong khi Lymphocyte, Basophil và LUC không bắt màu. Hổn hợp mẫu thử được phân tích trên hệ thống quang học với nguồn sáng tungsten, phân tích tán xạ góc hẹp 2-3o phản ảnh kích thước bạch cầu và độ hấp thu quang phản ảnh độ bắt màu (hoạt tính) men peroxidase của bạch cầu. Kết quả được trình bày trên biểu đồ Perox, đối chiếu kích thước bạch cầu và hoạt tính men peroxidase của bạch cầu, xử dụng ranh giới động (tìm điểm lỏm xuống thấp nhất phân chia hai quần thể tế bào khác nhau) để ghi nhận số lượng từng quần thể bạch cầu : Neutrophil, Eosinophil, Monocyte, LUC, và tổng của Lymphocyte + Basophil. Dữ liệu thu được từ cả 2 kênh Basophil-Lobularity và Peroxidase cho phép đưa ra được các thông số về bạch cầu như sau :- Số lượng bạch cầu : dựa trên số lượng đếm được trên kênh Peroxidase (gọi là thông số WBCP), có so sánh với số lượng đếm được trên kênh Basophil-Lobularity (gọi là thông số WBCB).- Số lượng tuyệt đối và phần trăm % các thành phần bạch cầu : Neutrophil, Eosinophil, Basophil, Lymphocyte, Monocyte, và LUC.- Chỉ số múi nhân (LI – Lobularity Index) và chỉ số hoạt tính peroxidase (MPXI – Mean Peroxidase Index) Ngoài ra còn các cảnh báo hình thái khác liên quan đến sự phân bố bất thường của bạch cầu : LEFT Shift (công thức bạch cầu chuyển trái, do gia tăng số múi nhân của bạch cầu hạt), IG-Immature Granulocyte (bạch cầu hạt chưa trưởng thành, tức là dạng Band), ATYP-Atypical Lymphocyte (lymphocyte không điển hình, đặc trưng thường thấy khi nhiễm siêu vi), BLAST (nghi ngờ có các tế bào đầu dòng bất thường). Điểm đặc biệt là hai thông số WBCB và WBCP được kiểm tra chéo với nhau. Hệ thống ADVIA 120 sẽ lưu ý người xử dụng khi hai số đo có sự chênh lệch quá một giới hạn nhất định và thường do một trong các nguyên nhân :- Bệnh lý khiếm khuyết men Myelo-peroxidase di truyền hay mắc phải, có thể gặp ở tần suất cho đến 0.5%. Trong trường hợp này sẽ có xu hướng giảm WBCP.- BUN (Urea Nitrogen) máu rất cao (> 200-250 mg/dL) làm ly giải không hoàn toàn hồng cầu, nên có xu hướng làm tăng WBCP.6. Nguyên tắc phân tích Tiểu Cầu Phương thức xử lý ban đầu và phân tích tiểu cầu cũng tương tự như khi khảo sát hồng cầu (xử dụng nguồn sáng là laser diode 670nm, và phân tích tán xạ), nhưng tiểu cầu được khảo sát 2 chiều ở ngưỡng thấp, phân tích góc hẹp (2-3o) phản ảnh kích thước tiểu cầu (volume), còn phân tích góc rộng (5-15o) phản ảnh mật độ tế bào (Cell density). Tín hiệu thu được trên mỗi góc là một cặp dữ liệu liên quan đến mỗi tiểu cầu đi ngang qua điểm đo (nguyên tắc khảo sát từng tế bào – cell-by-cell) và được đánh dấu trên biểu đồ theo lý thuyết Mie như khảo sát hồng cầu. Điểm đặc biệt là phương pháp này không loại trừ các tiểu cầu to (large platelets), nhưng để phân tích và đếm số lượng tiểu cầu to sẽ có nguy cơ nhầm lẫn với các thành phần khác như : mảnh hồng cầu, bóng ma hồng cầu… ; cũng như kích thước của tiểu cầu to thường chồng lấn với hồng cầu, đặc biệt là hồng cầu nhỏ. Do đó cần thêm yếu tố mật độ tế bào, và tiêu chí để phân biệt tiểu cầu thực sự so với các thành phần khác được căn cứ theo bảng dưới đây : Do đó, kết quả báo cáo số lượng tiểu cầu sẽ được tính chung với số tiểu cầu to đếm được, nhưng đã loại trừ các thành phần không phải là tiểu cầu. Ngoài ra khi số lượng tiểu cầu to vượt quá một giới hạn nhất định, sẽ có lưu ý hình thái Large Platelets hay Platelet Clump tương ứng. Tất nhiên là khi có mảnh hồng cầu, bóng ma hồng cầu… với số lượng đáng kể thì cũng sẽ có lưu ý hình thái tương ứng (RBC Fragments, RBC Ghosts).

(Nguồn: Bệnh viện)Ngày đăng: 03/07/2017Kích thước font In ấn

Bình luận chia sẻ

Bài viết mới nhấtThư mời chào giá mua sắm linh kiện thay thế cho máy thận nhân tạo Fresenius 4008S V1026/11/2024 / benhvienducgiangKính gửi: Các hãng sản xuất, nhà cung cấp tại Việt Nam Bệnh viện đa khoa Đức Giang có nhu cầu tiếp nhận báo giá để tham khảo xây dựng giá gói thầu, làm cơ sở tổ chức lựa chọn nhà thầu cho gói thầu mua sắm linh kiện, phụ kiện, vật tư thay thế cho máy thận nhân tạo Fresenius 4008S V10Thư mời chào giá tư vấn đánh giá E-HSDT26/11/2024 / benhvienducgiangKính gửi: Các đơn vị cung cấp dịch vụ tư vấn Bệnh viện đa khoa Đức Giang có nhu cầu tiếp nhận báo giá từ các đơn vị tư vấn để thực hiện công việc đánh giá E-HSDT Gói thầu số 25: Hóa chất xét nghiệm miễn dịch sinh hóaThư mời chào giá dụng cụ phòng mổ26/11/2024 / benhvienducgiangKính gửi: Các hãng sản xuất, nhà cung cấp vật tư y tế tại Việt Nam Bệnh viện đa khoa Đức Giang có nhu cầu tiếp nhận báo giá để tham khảo xây dựng giá gói thầu, làm cơ sở tổ chức lựa chọn nhà thầu cho gói thầu: Mua sắm bổ sung dụng cụ phòng mổ theo bộ phục vụ công tác chuyên môn.Chỉ số hài lòng25/11/2024 / benhvienducgiangCăn cứ công văn số 5670/SYT-VP ngày 13 tháng 11 năm 2024 của Sở Y tế Hà Nội về việc thông tin, tuyên truyền đến người dân sinh sống trên địa bàn và cá nhân, tổ chức có giao dịch về phương án đo lường chỉ số hài lòng đối với sự phục vụ của Sở Y tế và các đơn vị trực thuộcHà Nội đẩy mạnh phòng, chống xâm hại trẻ em trên không gian mạng25/11/2024 / benhvienducgiangUBND TP Hà Nội ban hành Công văn về việc triển khai thực hiện các biện pháp phòng, chống xâm hại trẻ em trên không gian mạng.Tin đã đăngSôi nổi chung kết hội thi điều dưỡng giỏi Bệnh viện Đa khoa Đức Giang năm 202409/10/2024Bệnh viện đa khoa Đức Giang kỷ niệm 61 năm thành lập bệnh viện và công bố 05 ca ghép thận thành công08/10/2024Hội nghị Quản lý chất lượng và An toàn người bệnh năm 2024: “Nâng cao năng lực chẩn đoán vì sự an toàn người bệnh” 01/10/2024 Trả kết quả online Giá khám chữa bệnh Danh mục kỹ thuật Góc tri ân Hỏi đáp Thư viện ảnh Videos

Videos

Hình ảnh

Bệnh viện ĐỨC GIANG

Giới thiệu Thẻ khám bệnh gia đình Tuyển dụng Tầm soát ung thư Tư vấn Tin tức Dịch vụ Các gói dịch vụ Hợp tác Thông tin khoa học Truyền thông sức khỏe Thông tin dược lâm sàng Từ thiện Giá khám chữa bệnh Danh mục kỹ thuật được phê duyệt THÔNG TIN TIÊM CHỦNG VẮC XIN COVID 19

Thông tin liên hệ

BỆNH VIỆN ĐA KHOA ĐỨC GIANG 54 Trường Lâm, Phường Đức Giang ,Long Biên, Hà Nội bvdkdg@hanoi.gov.vn http://benhvienducgiang.com Phòng CTXH: 0986.953.505Đăng ký khám qua tổng đài: 1900.292919Hotline: 0966.381.616

Kết nối với chúng tôi

Copyright 2017 © benhvienducgiang.com