PHƯƠNG PHÁP SẮC KÝ GIẤY - TaiLieu.VN

Mạng xã hội chia sẻ tài liệu Upload Đăng nhập Nâng cấp VIP Trang chủ » Khoa Học Tự Nhiên » Hoá học5 trang 1588 lượt xem 1390PHƯƠNG PHÁP SẮC KÝ GIẤY

Phương pháp sắc ký giấy, cũng như phương pháp sắc ký lớp mỏng, được áp dụng trong kiểm nghiệm chất lượng thuốc để định tính, thử tinh khiết, bán định lượng và định lượng. Sự tách các chất bằng phương pháp sắc ký giấy dựa chủ yếu trên sự khác nhau về hệ số phân bố của chúng giữa hai pha lỏng: Một pha tĩnh và một pha động. Pha tĩnh ở đây là nước có sẵn trong sợi celulose của giấy, hoặc thành phần thân nước từ hỗn hợp dung môi của pha động được hút chọn lọc...

Chủ đề:

truongthiuyen18

Sắc ký và phổ hấp thụ

Tài liệu Sắc ký và phổ hấp thụ

SaveLikeShareReport Download AI tóm tắt /5 PHƯƠNG PHÁP SẮC KÝ GIẤY Phương pháp sắc ký giấy, cũng như phương pháp sắc ký lớp mỏng, được áp dụng trong kiểm nghiệm chất lượng thuốc để định tính, thử tinh khiết, bán định lượng và định lượng. Sự tách các chất bằng phương pháp sắc ký giấy dựa chủ yếu trên sự khác nhau về hệ số phân bố của chúng giữa hai pha lỏng: Một pha tĩnh và một pha động. Pha tĩnh ở đây là nước có sẵn trong sợi celulose của giấy, hoặc thành phần thân nước từ hỗn hợp dung môi của pha động được hút chọn lọc vào giấy. Pha động là một hệ dung môi thích hợp cho sự tách đã được quy định trong các chuyên luận. Mức độ di chuyển của một chất được đặc trưng bởi hệ số di chuyển (Rf) và tính bằng tỷ lệ giữa khoảng cách di chuyển của chất đó và khoảng cách di chuyển của dung môi: Rf = a/b. Trong đó: a là khoảng cách di chuyển của chất phân tích, b là khoảng cách di chuyển của dung môi.Giá trị Rf bao giờ cũng nhỏ hơn 1. Trong trường hợp sắc ký liên tục không còn xác định được giới tuyến của dung môi, người ta dùng hệ số di chuyển Rr. Rr là tỷ số giữa khoảng cách di chuyển của chất phân tích và khoảng cách di chuyển của chất dùng làm chuẩn so sánh. Giá trị Rr có thể nhỏ hơn hay lớn hơn 1. Cách tiến hành Chuẩn bị bình sắc ký: Bình sắc ký là những bình thủy tinh hình trụ hoặc hình hộp dẹt, có kích thước thích hợp, có nắp đậy kín. Nắp có lỗ ở giữa để lắp bình gạn có khoá đựng dung môi. Trong bình có các giá để máng đựng dung môi và treo giấy sắc ký được thiết kế thích hợp cho kiểu sắc ký đi lên hay sắc ký đi xuống. Chuẩn bị dung môi: Thành phần và tỷ lệ các hệ dung môi được quy định trong các chuyên luận. Việc trộn các thành phần được tiến hành trong bình gạn, sau khi lắc đều, để yên. Nếu có tách lớp thì gạn lấy lớp pha thân nước, thường là lớp dưới, làm dung môi pha tĩnh để bão hoà giấy sắc ký sau khi đã chấm các chất phân tích, còn lớp trên dùng làm dung môi pha động. Nếu dung môi không tách lớp thì dùng chính dung môi đó để bão hoà giấy sắc ký. Chuẩn bị giấy: Giấy sắc ký là loại giấy đặc biệt dành riêng cho sắc ký, có bề dày thích hợp. Tuỳ theo kích thước của bình và số lượng các vết cần chấm mà cắt những khổ giấy hình chữ nhật thích hợp, chiều dài dọc theo thớ giấy. Chiều rộng phải nhỏ hơn chiều dài của máng dung môi nhưng không được nhỏ hơn 2,5 cm. Bề dài phải tính sao cho khi treo giấy vào bình không được để đầu dưới chạm vào máng dung môi trong khi bão hoà dung môi. Trường hợp bình sắc ký có hình chuông úp thì giấy phải cuộn tròn và cố định bằng móc thủy tinh hoặc khâu bằng chỉ. Đường kính của cuộn giấy phải nhỏ hơn đường kính của đĩa để giấy (sau khi đã bão hoà bình sẽ rót dung môi vào đĩa này) nhằm tránh giấy chạm vào thành đĩa.Chấm sắc ký: Kẻ một đường chì mảnh song song với mép giấy (đường vạch để chấm sắc ký) theo chiều rộng và cách mép giấy 3 cm đối với sắc ký đi lên để sao cho các vết chấm không bị ngập vào dung môi, 6 cm đối với sắc ký đi xuống để vạch chấm không trùng với đũa thủy tinh đỡ giấy mà thấp hơn 2 cm khi đặt giấy treo vào máng ở phần trên của bình. Dùng micropipet chia độ tới 0,001 - 0,002 ml hoặc mao quản có dung tích xác định (2 l; 5 l; 10 l) để chấm các dung dịch chất cần sắc ký thành vết có đường kính không quá 8 mm. Muốn giữ đường kính của vết chấm nhỏ, phải chấm nhanh nhiều lần, đợi giọt trước khô mới chấm tiếp.Lượng chấm và nồng độ dung dịch chất thử được quy định trong chuyên luận. Khi chấm nhiều vết trên một dải giấy thì vết chấm nọ phải cách vết chấm kia ít nhất là 30 mm. Triển khai sắc ký: Phương pháp sắc ký đi lên: Rót dung môi làm pha động vào máng dung môi để được một lớp dung môi cao 2,5 cm, và trong trường hợp pha tĩnh được chỉ định (là phần tách lớp phía dưới khi trộn hỗn hợp dung môi) thì rót pha tĩnh vào khe giữa máng dung môi và thành bình sắc ký. Đậy kín nắp bình, để yên trong 24 giờ ở nhiệt độ 20 - 25oC và duy trì ở nhiệt độ này trong quá trình tiếp theo. Sau đó treo giấy đã chuẩn bị vào bình, đậy nắp, để yên tiếp 1 giờ 30 phút. Tiếp theo dùng tay vặn ở ngoài bình để hạ tờ giấy sắc ký vào máng dung môi sao cho vạch chấm không ngập vào dung môi. Triển khai sắc ký đến một thời gian hoặc một khoảng cách quy định trong chuyên luận. Lấy giấy ra, đánh dấu ngay giới tuyến dung môi và để khô ngoài không khí hoặc làm khô bằng không khí nóng của máy quạt sấy. Phải chú ý tránh ánh sáng trong suốt quá trình triển khai. Làm hiện vết bằng cách phun thuốc thử màu thích hợp, hoặc soi dưới đèn tử ngoại theo quy định của chuyên luận. Tính giá trị Rf và đánh giá kết quả. Phương pháp sắc ký đi xuống: Cũng tiến hành tương tự như sắc ký đi lên, chỉ khác các điểm sau đây: Rót dung môi làm pha tĩnh vào đáy bình, tạo một lớp cao khoảng 2 cm; đặt giấy vào máng dung môi ở phần trên bình, dùng một đũa thủy tinh để chèn giấy, gác đầu giấy treo qua đũa thủy tinh để không cho giấy chạm vào mép máng và chạm vào thành bình. Sau thụứi gianủeồ baừo hoứa bỡnh vaứ giaỏy theo quy ủũnh nhử treõn, roựt pha ủoọng vaứo maựng ủửùng dung moõi ụỷ phớa treõn. Thường sắc ký đi xuống được áp dụng cho các hỗn hợp khó tách và phải chạy sắc ký liên tục nên phải tính kết quả theo Rr.

Tài liệu liên quan

Tính toán hệ số hiệu chỉnh tự hấp thụ, phân lập vi khuẩn Enterobacteriaceae từ mẫu bò bía thu thập tại Thành phố Hồ Chí Minh và khảo sát sự đề kháng kháng sinh của chúng

12 trang

Nghiên cứu định lượng đồng thời một số flavonoid trong nước cam việt nam bằng phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao

8 trang

Định lượng acid amin máu và dịch sinh học bằng máy sắc ký lỏng siêu hiệu năng (UPLC)

15 trang

Nghiên cứu phân tích một số perfluorocarboxylic acids (PFCAs) trong mẫu bụi trong nhà bằng phương pháp sắc ký lỏng ghép nối khối phổ hai lần (LC-MS/MS)

11 trang

Nghiên cứu phân tích hydrocarbon thơm đa vòng (PAHs) trong mẫu móng tay và tóc bằng phương pháp sắc ký khí khối phổ (GC/MS)

10 trang

Ứng dụng phương pháp quang phổ hấp thụ phân tử để xác định độ phân hủy sinh học của chất hoạt động bể mặt trong nước rửa chén

8 trang

Ảnh hưởng của thời gian thủy nhiệt đến hiệu suất lượng tử của dung dịch cacbon nano được chế tạo từ quả gấc

9 trang

Định lượng đồng thời hydrochlorothiazid và irbesartan bằng phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao

7 trang

Xét nghiệm sàng lọc người mang gen bệnh tan máu bẩm sinh (thalassemia) sử dụng phổ hấp thụ phân tử

7 trang

Xây dựng và thẩm định quy trình định lượng arsen, chì, cadmium, thủy ngân trong đất trồng dược liệu bằng phương pháp quang phổ hấp thu nguyên tử

8 trang

Tài liêu mới

Bài giảng Liên kết hóa học và cấu tạo phân tử - TS. Hoàng Thị Tuyết Nhung

105 trang

Bài giảng Cấu tạo nguyên tử - TS. Hoàng Thị Tuyết Nhung

75 trang

Bài giảng Tốc độ và cơ chế phản ứng, cân bằng hóa học

85 trang

Đề cương ôn tập Hóa dược năm 2024-2025

2 trang

Ngân hàng câu hỏi trắc nghiệm kết thúc học phần Hoá dược

3 trang

Đề cương Hóa học vô cơ 1

61 trang

Giáo trình Hóa đại cương – vô cơ (Dùng cho đào tạo dược sĩ đại học) - Trường đại học Tây Đô

125 trang

Tổng hợp dẫn xuất quinolizine - chalcone

8 trang

Lactic acid production by Bacilluscoagulans-Kinetic studies andoptimization of culture medium forbatch and continuous fermentations

9 trang

Trắc nghiệm Cấu tạo nguyên tử - Bảng hệ thống tuần hoàn

24 trang

Tài liệu 68 câu lý thuyết hóa học

107 trang

Đề thi kết thúc học phần Nguyên lí Hóa học 2

1 trang

Bài tập môn Hóa đại cương

17 trang

Bài giảng NaHCO3: Tìm hiểu về Natri Bicarbonat (Baking Soda)

8 trang

Bài thuyết trình: For the Development of Lithium-Ion Batteries

25 trang

AI tóm tắt

- Giúp bạn nắm bắt nội dung tài liệu nhanh chóng!

Giới thiệu tài liệu

Đối tượng sử dụng

Từ khoá chính

Nội dung tóm tắt

Giới thiệu

Về chúng tôi

Việc làm

Quảng cáo

Liên hệ

Chính sách

Thoả thuận sử dụng

Chính sách bảo mật

Chính sách hoàn tiền

DMCA

Hỗ trợ

Hướng dẫn sử dụng

Đăng ký tài khoản VIP

Zalo/Tel:

093 303 0098

Email:

[email protected]

Phương thức thanh toán

Theo dõi chúng tôi

Facebook

Youtube

TikTok

Chịu trách nhiệm nội dung: Nguyễn Công Hà Doanh nghiệp quản lý: Công ty TNHH Tài Liệu trực tuyến Vi Na - GCN ĐKDN: 0307893603 Địa chỉ: 54A Nơ Trang Long, P. Bình Thạnh, TP.HCM - Điện thoại: 0283 5102 888 - Email: [email protected]ấy phép Mạng Xã Hội số: 670/GP-BTTTT cấp ngày 30/11/2015