KIỂM NGHIỆM DƯỢC LIỆU CHỨA COUMARIN VÀ DL CHỨA TANIN

Có thể bạn quan tâm

Tải bản đầy đủ (.pdf) (15 trang)

Trang chủ

Luận Văn - Báo Cáo

Y khoa - Dược

KIỂM NGHIỆM DƯỢC LIỆU CHỨA COUMARIN VÀ DL CHỨA TANIN

Bạn đang xem bản rút gọn của tài liệu. Xem và tải ngay bản đầy đủ của tài liệu tại đây (1.48 MB, 15 trang )

BÀI BÁO CÁOTHỰC HÀNH BUỔI 5*****BÀI 8DƯỢC LIỆU CHỨA COUMARINI.Chiết xuất:Dược liệu : Tiền hồ.Phương pháp 1:1g bột tiền hồ+20 ml cồn 96% (lắc đều),BM 5’→Lọc qua bôngDịch lọcPhản ứngPhản ứngPhản ứng Phản ứng huỳnh quangvới dd FeCl3. đóng mở vòng lacton. với thuốc thử diazo.II.SKLMĐịnh tính coumarin bằng phản ứng hóa học:1. Phản ứng với dung dịch FeCl3:- Bước 1 : Nhỏ vài giọt dịch lọc thu được lên giấy lọc có ký hiệu T, và nhỏ vài giọtmẫu chuẩn ký hiệu C. ( Lưu ý :Chờ cho dung môi khô mới nhỏ giọt tiếp theo )- Bước 2 : Nhỏ vào tâm vòng tròn ký hiệu T 1 -2 giọt FeCl3 1%.➔ Kết quả :dương tínhmàu xanh(coumarin có-OH tự do).2. Phản ứngđóng mởvònglacton:- Bước 1 : chọn 2 ống nghiệm bằng nhau, mỗi ống 2 ml dịch lọc Tiền Hồ.- Bước 2 :+ Ống 1 : Thêm vào 4ml nước cất, lúc này dung dịch trở nên đục.+ Ống 2 : thêm 0,5ml NaOH10%.➔ Đun cách thủy 2-3 phút, bổ sung nước vào cho đến thể tích bằngống 1.➔ Kết quả : ống 2 trong hơn ống 1.- Tiếp tục acid hóa ống 2 bằng HCL đđ sẽ thấy 2 ống có đọ đụcgần như nhau.*Giải thích cơ chế phản ứng: Coumarin có vòng lacton (ester nội) nênbị mở vòng bởi kiềm tạo thành muối tan trong nước. Khi acid hóa,coumarin sẽ đóng vòng trở lại. Kiềm còn có tác dụng cắt các nhóm acyltrong dẫn chất acylcoumarin.3. Phản ứng với thuốc thử diazo:- Bước 1 : Cho vào ống nghiêm 2ml dịch lọc,thêm 1ml NaOH 5% → Đuncách thủy 2 phút rồi để nguội .- Bước 2 : Thêm từ từ từng giọt diazo cho đên khi xuất hiện màu đỏ hoặccam.*Giải thích cơ chế phản ứng: Khi ở môi trường kiềm yếu (NaOH 5%) , thủy phâncác phân tử coumarin có vị trí ortho – hay para – với nhóm OH phenol còn trốngvà không bị cản trở lập thể.+ Điều kiện thực hiện phản ứng với thuốc thử diazo : trong môi trường kiềm yếu,+ Nếu không mở vòng lacton, phản ứng không xảy ra.4. Sự tăng huỳnh quang trong môi trường kiềm dưới tác dụng của tia UV:- Bước 1 : Lấy 3ml dịchchiết cồn + 3 giọt NaOH5% → BM 3’.- Bước 2 : Nhỏ 1 giọt dịchchiết này lên 1 tờ giấy lọc(chờ khô và lập lại nhưtrên 4 lần nữa).- Bước 3 : Che nửa vết dịchbằng đồng xuĐem soi đèn UV nm 1-2 phút+ Lấy miếng kim loại ra sẽthấy nửa không bị che phátquang sang hơn nửa bị che .• Giải thích cơ chế phản ứng :Sau khi mở vòng lacton bằngkiềm(NaOH 5%) , coumarin tạo thành dẫn chất acidhydroxycinnamic ở dạng cis (acid coumarinic). Chất này dưới tácdụng của tia tử ngoại sẽ chuyển thành dạng trans ( acid coumaric)có huỳnh quang sáng hơn.III. Định tính coumarin bằng sắc ký lớp mỏng:• Chuẩn bị:o Bản sắc ký lớp mỏng: 1 bản chấm điểm, 1 bản chấm vạch.o Chuẩn bị dịch chiết: Ta lấy 3ml dich chiếc của dược liệu TiềnHồ.o Chuẩn bị hệ dung môi khai triển: pha 22ml hệ dung môi S1:benzene – EtOAc (10:1) → 20ml benzene : 2ml EtOAc.Cho dung môi vào 1 bình sắc ký ( đã lót sẵn giấy lọc) sao cholớp dung môi cao khoảng 0,5 cm. Đậy nắp bình sắc ký trong30 phút.• Khai triển:- Bản chấm điểm:+ Dùng chì kẻ một đường thẳng cách mép dưới từ 1 cm.+ Chia vạch xuất phát làm 3 phần bằng nhau.Đánh dấu 2 điểm: bêntrái kí hiệu là T, bên phải kí hiệu là C.+ Dùng mao quản lấy mẫu chuẩn có sẵn chấm từng điểm cách mépdưới 1cm rồi sau đó chờ khô, tiếp tục tiến hành dùng mao quản chấmmẫu thử sau cho mẫu thử nằm bên trái mẫu chuẩn.- Bản chấm vạch:+ Dùng chì kẻ một đường thẳng cách mép dưới từ 1-1,5 cm+ Chia vạch xuất phát làm 3 phần bằng nhau. : bên trái kí hiệu là T,bên phải kí hiệu là C.+ Dùng mao quản lấy mẫu chuẩn có sẵn chấm từng điểm thành mộtvạch hoặc chấm kéo thành một vạch cách mép dưới 1cm rồi sau đóchờ khô, tiếp tục tiến hành dùng mao quản chấm mẫu thử sau chomẫu thử nằm bên trái mẫu chuẩn.❖ Phát hiện vết và tính giá trị Rf365 nm254 nm❖ Tính Rf :Bảng chấm điểm :+ Rfv1= 0,02+ Rfv2= 0,07+ Rfv3= 0,2+ Rfv4= 0,4+ Rfv5= 0,5Bảng chấm vạch :+ Rfv1= 0,1+ Rfv2= 0,2+ Rfv3= 0,3+ Rfv4= 0,4+ Rfv5= 0,5BÀI 10DƯỢC LIỆU CHỨA TANIN*****I.Định tính tannin1. Chiết các hợp chất tannin từ dược liệu:1g bột dược liệu20ml nước sôi → BM ( lắc đều khi ) 10’sau đó lọc dịch nóng qua bôngDịch lọcPhản ứng với thuốc thử diazo .Định tính phân biệt 2 loại tannin.2. Định tính chung tannin trong dược liệu:2.1. Phản ứng với dung dịch protein:- Bước 1 : Lấy 1ml mỗi dịch chiết cho vào 2 ống nghiệm ( ống 1 : Ổi, ống 2 :Lá Bàng ) → thêm 3 giọt thuốc thử gelatin muối, lắc nhẹ➔ Kết quả : Phản ứng dương tính ở 2 ống có tủa trắng đục.2.2Định tính phân biệt 2 loại tannin (lá Bàng và Ổi):❖ Lá bàng :- Ống 1 : 2 ml dịchchiết + 1 giọt thuốcthử FeCl3 1%.➔ Kết quả : dung dịchcó màu xanh rêu- Ống 2 : 2 ml dịch chiết + 1 ml TT.Tiasny ( Formol – HCl đậm đặc, 2 : 1 ) →BM 10’→ Kết quả : tủa vón, đỏ gạchKết Luận : Lá Bàng có chứa loại tannin pyrocatechic.❖ Lá Ổi- Ống 3 : 2 ml dịch chiết + 1 giọt thuốc thử FeCl3 1%➔ Kết quả : Xanh đen- Ống 4 : cho 2 ml dịchchiết + 1 ml TT. Tiasny( Formol – HCl đậmđặc, 2 : 1 ) → BM 10’➔ Kết quả : tủa vón, đỏgạch .Kết luận : Lá Ổi có chứa 2 loại Tanin : Taninpyrogallic và Tannin pyrocatechic.

Tài liệu liên quan

Nghiên cứu chiết tách, tinh chế một số hợp chất tự nhiên đặc trưng từ dược liệu để làm chất chuẩn phục vụ kiểm nghiệm dược liệu
- 944
- 1
- 7
DƯỢC LIỆU CHỨA TANIN ppt
- 15
- 8
- 163
Một số yếu tố thường gặp trong kiểm nghiệm dược liệu bằng kính hiển vi
- 51
- 1
- 5
Xây dựng dự thảo tiêu chuẩn kiểm nghiệm dược liệu cần tây
- 55
- 1
- 3
Xây dựng dự thảo tiêu chuẩn kiểm nghiệm dược liệu nần nghệ
- 59
- 762
- 1
Xây dựng tiêu chuẩn kiểm nghiệm dược liệu xích đồng nam tại tỉnh hà tĩnh
- 63
- 1
- 3
Nghiên cứu so sánh đặc điểm vi học và thành phần hóa học của 3 mẫu rễ cây bá bệnh hướng tới xây dựng tiêu chuẩn kiểm nghiệm dược liệu
- 63
- 652
- 3
Nghiên cứu thành phần hóa học vị thuốc khổ sâm cho lá phục vụ công tác kiểm nghiệm dược liệu trên thị trường
- 69
- 607
- 8
Nghiên cứu sử dụng đặc điểm hạt phấn hoa trong kiểm nghiệm dược liệu
- 69
- 300
- 0
Sử dụng sắc ký lớp mỏng hai chiều trong kiểm nghiệm dược liệu
- 52
- 868
- 0