Phương Pháp PCR-RFLP - Bảng Tin Công Nghệ Trang

Trang chủ » Nguyên Lý Của Rflp » Phương Pháp PCR-RFLP - Bảng Tin Công Nghệ Trang

Có thể bạn quan tâm

Phương pháp PCR- RFLP
    Home
  • TIN CÔNG NGHỆ
  • Phương pháp PCR- RFLP
05 Th6

Phương pháp PCR- RFLP

ctdtuyet2017-08-16T18:24:07+07:00 By ctdtuyet TIN CÔNG NGHỆ Li trích DNA, phương pháp PCR, phương pháp PCR - RFLP, Phương pháp điện di, Định lượng DNA 0 Comments PHƯƠNG PHÁP PCR- RFLP

Phương pháp PCR- RFLP là gì?

PCR là một kỹ thuật của sinh học phân tử cho phép nhân bản một đoạn DNA mong muốn từ hệ gen DNA của sinh vật thành nhiều bản sao ở bên ngoài tế bào.

RFLP là kỹ thuật nghiên cứu tính đa hình chiều dài của các phân đoạn DNA dựa trên điểm cắt các enzyme giới hạn (Restriction Enzyme, RE)

Phương pháp PCR-RFLP được phát minh dựa trên kĩ thuật PCR (Polymerase Chain Reaction,) được ứng dụng để xác định đa hình gen của các gen ứng viên.

Kỹ thuật PCR-RFLP được tiến hành theo các bước sau:

Phương pháp PCR- RFLP

Phương pháp PCR- RFLP

Li trích DNA từ mô sống

          Tùy vào từng loại mô sống khác nhau mà tiến hành li trích DNA bằng các phương pháp khác nhau. Tuy nhiên chúng điều tiến hành theo nguyên tắc chung.

Quy trình tách chiết DNA

Quy trình tách chiết DNA

Định lượng DNA bằng phương pháp quang phổ

Quang phổ UV được như 1 kỹ thuật định lượng để đo nồng độ của DNA protein. DNA hấp thụ mạnh ở bước sóng 260 nm và kém ở 280 nm trong khi protein thì ngược lại.

DNA được đánh giá là sạch khi có tỷ số 260/280 nằm trong khoảng  1,7-2,0. Việc nhiễm protein sẽ làm tỷ số 260/280 thấp hơn 1,7 ngoài ra sự hiện diện của các chất hữu cơ như phenol, chloroform có thể ảnh hưởng đến nồng độ và độ tinh sạch của DNA.

          Nồng độ DNA ( ng/µl ): 50 x HSPL x OD260

Trong đó:

             HSPL: hệ số pha loãng              OD260: chỉ số được đo ở bước sóng 260nm

Khuếch đại DNA cần nghiên cứu bằng phương pháp PCR

PCR là phương pháp dựa trên khả năng tái bản phân tử DNA ở ngoài cơ thể. Về nguyên tắc, để tái bản, phân tử DNA cần có một số yếu tố sau: enzyme DNA polymerase; dNTPs; MgCl2;  primer; DNA mẫu.

Sản phẩm PCR được cắt bởi enzyme giới hạn.

Nguyên tắc: dựa trên độ đặc hiệu của các enzyme cắt giới hạn đối với vị trí nhận biết của chúng trên DNA. Sự khác biệt vị trí cắt giữa hai cá thể sẽ tạo ra những phân đoạn cắt khác nhau.

Khi ủ sản phẩm PCR với enzyme cắt giới hạn trong dung dịch đệm, pH, nhiệt độ thích hợp sẽ tạo ra đoạn DNA với kích thước khác nhau. 

Điện di trên gel agarose và đọc kết quả

Phương pháp điện di nhằm kiểm tra chất lượng DNA, sản phẩm PCR và sản phẩm cắt enzyme. Tùy vào sản phẩm cần kiểm tra mà sử dụng nồng độ gel agarose, thời gian và hiệu điện thế trong quá trình điện di cho phù hợp. Khi một điện trường được ứng dụng chạy xuyên qua gel, DNA mang điện tích âm ở pH trung tính sẽ chạy về hướng anode, tốc độ di chuyển của các đoạn DNA tỉ lệ thuận với điện thế. Dung dịch đệm điện di ảnh hưởng đến tính di chuyển của DNA trong gel, trong phòng thí nghiệm các dung dịch đệm điện di thường được sử dụng là TAE, TBE, TPE.

————————————

Mọi chi tiết xin liên hệ:

Công ty Cổ Phần Công Nghệ Hiển Long B40 KDC Kim Sơn, Nguyễn Hữu Thọ, Q.7, HCM Phòng kinh doanh. Ms.Tuyết. 0978.260.025 Mail: [email protected]

Share this post

FacebookTwitterLinkedInGoogle +Email

Author

ctdtuyet

Chuyên cung cấp thiết bị phòng thí nghiệm

Để lại một bình luận Hủy

Email của bạn sẽ không được hiển thị công khai. Các trường bắt buộc được đánh dấu *

Bình luận *

Tên *

Email *

Trang web

Δ

Website này sử dụng Akismet để hạn chế spam. Tìm hiểu bình luận của bạn được duyệt như thế nào.

Related Posts

15 Th12

Thiết bị ổn nhiệt – Những vấn đề cần quan tâm khi mua

Thiết bị ổn nhiệt – Những vấn đề cần quan tâm khi mua bao gồm các yếu tố: dãi... read more

15 Th11

Phương pháp xác định độ săn của sợi tách ra từ vải

PHƯƠNG PHÁP XÁC ĐỊNH ĐỘ SĂN CỦA SỢI TÁCH RA TỪ VẢI Phương pháp này chỉ áp dụng cho sợi... read more

25 Th11

Phương pháp schopper-riegler – xác định độ thoát nước của bột giấy

PHƯƠNG PHÁP SCHOPPER-RIEGLER (ĐỘ NGHIỀN SR) – XÁC ĐỊNH ĐỘ THOÁT NƯỚC CỦA BỘT GIẤY Phương pháp Schopper-Riegler là gì? Phép... read more

21 Th9

Cách sử dụng dụng cụ đo độ bền uốn màng sơn

CÁCH SỬ DỤNG DỤNG CỤ ĐO ĐỘ BỀN UỐN MÀNG SƠN, VẬT LIỆU PHỦ Cách sử dụng dụng cụ đo... read more

22 Th8

Đo oxy hòa tan trong nước bằng phương pháp điện cực

ĐO OXY HÒA TAN TRONG NƯỚC BẰNG PHƯƠNG PHÁP ĐIỆN CỰC Kiểm tra nồng độ oxy trong nước phương pháp... read more

04 Th3

Cách sử dụng dụng cụ đo độ bền va đập màng sơn (độ biến dạng nhanh)

CÁCH SỬ DỤNG DỤNG CỤ ĐO ĐỘ BỀN VA ĐẬP MÀNG SƠN (ĐỘ BIẾN DẠNG NHANH) Cách sử dụng dụng cụ đo... read more

26 Th7

Độ ẩm gỗ – chỉ tiêu quan trọng trong việc đánh giá chất lượng gỗ.

ĐỘ ẨM GỖ – CHỈ TIÊU QUAN TRỌNG TRONG VIỆC ĐÁNH GIÁ CHẤT LƯỢNG GỖ Độ ẩm gỗ – chỉ... read more

13 Th7

Danh mục thiết bị kiểm tra độ nhớt Brookfield

DANH MỤC THIẾT BỊ KIỂM TRA ĐỘ NHỚT BROOKFIELD Danh mục thiết bị kiểm tra độ nhớt Brookfield Khái niệm độ... read more

06 Th8

Cách xác định độ tươi của thịt dựa vào pH bằng bút đo pH bỏ túi LAQUAtwin

Cách xác định độ tươi của thịt dựa vào pH bằng bút đo pH bỏ túi LAQUAtwin xuất sứ... read more

12 Th3

Phương pháp kiểm tra nồng độ ion Natri trong thực phẩm

KIỂM TRA NỒNG ĐỘ ION NATRI TRONG THỰC PHẨM Phương pháp kiểm tra nồng độ ion Natri trong thực phẩm... read more

Get in touch

THÔNG TIN LIÊN HỆ

Ms. Tuyết 0978 260 025CÔNG TY CỔ PHẦN CÔNG NGHỆ HIỂN LONGTại HCM: 126 Đường số 2, Khu Dân Cư Tân Phong-Kim Sơn, Phường Tân Phong, Quận 7, Thành phố Hồ Chí Minh,Tại Hà Nội: Tầng thứ 7 Tòa nhà Machino, số 10 đường Trần Phú, Phường Mộ Lao, quận Hà Đông, Hà Nội

THỐNG KÊ TRUY CẬP

  • Online Visitors: 1
  • Today's Visitors: 70
  • Yesterday's Visitors: 113
FacebookTwitterPinterestLinkedinGoogle +Tumblr labshopvn.com. 2015 Contact Me on Zalo

Từ khóa » Nguyên Lý Của Rflp