Chương 7: PHƯƠNG PHÁP PHÂN TÍCH TRÌNH TỰ AXIT NUCLEIC

Trang chủ » Trình Tự Axit Nucleic » Chương 7: PHƯƠNG PHÁP PHÂN TÍCH TRÌNH TỰ AXIT NUCLEIC

Có thể bạn quan tâm

OPTADS360 intTypePromotion=1 zunia.vn Tuyển sinh 2024 dành cho Gen-Z zunia.vn zunia.vn tailieu.vn NÂNG CẤP Đăng Nhập | Đăng Ký Chủ đề »
  • Công nghệ sinh học
  • Đa dạng sinh học
  • Nhiễm sắc thể
  • Đột biến gen
  • Cơ thể người
  • HOT
    • CMO.03: Bộ Tài Liệu Hệ Thống Quản Trị...
    • CEO.27: Bộ Tài Liệu Dành Cho StartUp...
    • FORM.04: Bộ 240+ Biểu Mẫu Chứng Từ Kế...
    • CEO.24: Bộ 240+ Tài Liệu Quản Trị Rủi...
    • FORM.07: Bộ 125+ Biểu Mẫu Báo Cáo...
    • TL.01: Bộ Tiểu Luận Triết Học
    • CEO.29: Bộ Tài Liệu Hệ Thống Quản Trị...
    • FORM.08: Bộ 130+ Biểu Mẫu Thống Kê...
    • LV.11: Bộ Luận Văn Tốt Nghiệp Chuyên...
    LV.26: Bộ 320 Luận Văn Thạc Sĩ Y Học
TUYỂN SINH YOMEDIA ADSENSE Trang Chủ » Khoa Học Tự Nhiên » Sinh học Chương 7: PHƯƠNG PHÁP PHÂN TÍCH TRÌNH TỰ AXIT NUCLEIC

Chia sẻ: Hồ Thanh Tuấn Tuấn | Ngày: | Loại File: PPT | Số trang:8

Thêm vào BST Báo xấu 588 lượt xem 101 download Download Vui lòng tải xuống để xem tài liệu đầy đủ

Nguyên tắc cơ bản của kĩ thuật đọc trình tự (DNA sequencing): Là kĩ thuật xác định tất cả những hợp phần do nucleotide hình thành nên phân tử DNA. Các công trình đầu tiên về “DNA sequencing” được công bố bởi Maxam và Gilbert (1977), Sanger và cs (1977). Cấu trúc của chuỗi DNA là dây xoắn đôi, liên kết với nhau bởi liên kết hidro. Trên mỗi dây có một chuỗi các base, tập hợp của bốn nucleotide : A, T, C, G....

AMBIENT/ Chủ đề:
  • công nghệ gen và tế bào
  • phân tích trình tự axit nucleic
  • kĩ thuật đọc trình tự
  • phương pháp hóa học
  • phương pháp enzyme học của sanger

Bình luận(0) Đăng nhập để gửi bình luận!

Đăng nhập để gửi bình luận! Lưu

Nội dung Text: Chương 7: PHƯƠNG PHÁP PHÂN TÍCH TRÌNH TỰ AXIT NUCLEIC

  1. Chương 7 PHƯƠNG PHÁP PHÂN TÍCH TRÌNH TỰ AXIT NUCLEIC 1. Nguyên tắc cơ bản của kĩ thuật đọc trình tự (DNA sequencing) - Là kĩ thuật xác định tất cả những hợp phần do nucleotide hình thành nên phân tử DNA. - Các công trình đầu tiên về “DNA sequencing” được công bố bởi Maxam và Gilbert (1977), Sanger và cs (1977). - Cấu trúc của chuỗi DNA là dây xoắn đôi, liên kết với nhau bởi liên kết hidro. Trên mỗi dây có một chuỗi các base, tập hợp của bốn nucleotide : A, T, C, G. - Kĩ thuật DNA sequencing dựa trên kĩ thuật điện di, sử dụng gel loại polyacrylamide có độ phân giải cao.
  2. 2. Phương pháp hóa học (Maxam và Gilbert) Dựa vào sự thủy giải đặc trưng phân tử DNA cần xác định trình tự bằng phương pháp hóa học. Trước hết DNA được đánh dấu bằng P32 ở một đầu. Sau đó, chúng được chia thành năm phân đoạn, mỗi phân đoạn được xử lí với một chất hóa học chuyên biệt (có khả năng biến đổi đặc hiệu 1 loại nucleotide)  phân cắt DNA ngay tại vị trí có nucleotide bị biến đổi. Kết quả: tạo ra 5 tập hợp, mỗi tập hợp là các oligonuclotide có kích thước khác nhau nhưng đều kết thúc tại cùng một loại nucleotide. Tiến hành điện di trên gel polyacrilamide, vị trí các oligonucleotide tương ứng với kích thước của chúng.
  3. Các hóa chất sử dụng trong xử lí các base chuyên biệt Hóa chất Base bị ảnh hưởng Dimethyl sulfate pH 8 G Piperidine formate pH 2 A+G Hydrazine A+ T Hydrazine + 1,5 M NaCl C Nhiệt độ cao (900C), 1,2 M NaOH A >C
  4. Giải trình tự một đoạn oligonucleotide theo phương pháp hóa học
  5. 3. Phương pháp enzyme học của Sanger thông qua việc sử dụng các dideoxynucleotide. Dựa vào sự tổng hợp nhờ enzyme DNA polymerase mạch bổ sung cho trình tự DNA mạch đơn cần xác định trình tự. Sử dụng 4 loại nucleotide thông thường + 4 dideoxynucleotide. Dideoxynucleotide là deoxynucleotide, nhóm 3’ OH được thay thế bằng H2 Khi các Dideoxynucleotide bắt cặp bổ sung với nucleotide tương ứng trên mạch gốc thì phản ứng tổng hợp ngừng lại do không tạo được liên kết phosphodister.
  6. Nguyên tắc của phương pháp giải trình tự theo Sanger
  7. Giải trình tự một đoạn oligonucleotide theo phương pháp enzyme học
  8. 4. Các phương pháp cải biên từ phương pháp của Sanger  Xác định trình tự bằng máy tự động: Trong kĩ thuật này, không dùng các đồng vị phóng xạ, thay vào đó là các hóa chất có khả năng phát huỳnh quang (fluochrome). Mỗi loại Dideoxynucleotide được đánh dấu bằng fluochrome có màu khác nhau. Tất cả các oligonucleotide cùng chấm dứt tại một loại Dideoxynucleotide sẽ có cùng một màu. Điện di  kết quả được đọc nhờ hệ thống vi tính  Kết hợp phương pháp PCR và sử dụng các Dideoxynucleotide Chỉ sử dụng khi vùng cần xác định trình tự đã được biết trước, và trong phát hiện đột biến điểm.
ADSENSE

CÓ THỂ BẠN MUỐN DOWNLOAD

  • Cơ học kỹ thuật - Phương pháp phần tử hữu hạn

    pdf 224 p | 418 | 155

  • Giáo trình hóa và vi sinh vật nước - Chương 3

    pdf 13 p | 267 | 101

  • Giáo trình Phân tích hệ thống môi trường (Environmental system analysis): Phần 2 - TS. Chế Đình Lý

    pdf 118 p | 274 | 100

  • Giáo trình Giải tích số: Phần 2

    pdf 106 p | 260 | 88

  • PHƯƠNG PHÁP PHÂN TÍCH CÁC CHỈ TIÊU MÔI TRƯỜNG - CHƯƠNG 7

    pdf 13 p | 266 | 72

  • Giáo trình -Phân tích số liệu bằng R-chương 7-8

    pdf 50 p | 160 | 56

  • Giáo trình về phân tích môi trường - Phần 1 - CHƯƠNG 7

    pdf 10 p | 194 | 55

  • Hướng dẫn Giải tích mạng bằng phương trình căn bản

    pdf 231 p | 168 | 55

  • PHƯƠNG PHÁP PHÂN TÍCH CÁC CHỈ TIÊU MÔI TRƯỜNG ( ThS. ĐINH HẢI HÀ ) - CHƯƠNG 7

    pdf 0 p | 148 | 40

  • Hệ sinh thái - Cách tính toán trong các hệ sinh thái: Phần 2

    pdf 73 p | 131 | 22

  • Bài giảng Toán T1: Chương 7 - ThS. Huỳnh Văn Kha

    pdf 17 p | 127 | 13

  • Bài giảng Hóa phân tích - Chương 7.1: Phương pháp phân tích thể tích (Lâm Hoa Hùng)

    pdf 26 p | 36 | 6

  • Bài giảng Hóa phân tích - Chương 7.2: Phương pháp phân tích thể tích (Phương pháp chuẩn độ)

    ppt 33 p | 20 | 5

  • Bài giảng Toán ứng dụng trong kinh tế: Chương 7 - TS. Lê Minh Hiếu

    pdf 25 p | 14 | 5

  • Bài giảng Hóa phân tích - Chương 7.2: Phương pháp phân tích thể tích (Lâm Hoa Hùng)

    pdf 42 p | 22 | 3

  • Bài giảng Hóa phân tích - Chương 7.3: Phương pháp phân tích thể tích (Lâm Hoa Hùng)

    pdf 42 p | 27 | 3

  • Thực hành Toán cao cấp - Chương 7: Dãy, chuỗi số và ứng dụng

    pdf 17 p | 23 | 3

Thêm tài liệu vào bộ sưu tập có sẵn: Đồng ý Thêm vào bộ sưu tập mới: *Tên bộ sưu tập Mô Tả: *Từ Khóa: Tạo mới Báo xấu
  • Hãy cho chúng tôi biết lý do bạn muốn thông báo. Chúng tôi sẽ khắc phục vấn đề này trong thời gian ngắn nhất.
  • Không hoạt động
  • Có nội dung khiêu dâm
  • Có nội dung chính trị, phản động.
  • Spam
  • Vi phạm bản quyền.
  • Nội dung không đúng tiêu đề.
Hoặc bạn có thể nhập những lý do khác vào ô bên dưới (100 ký tự): Vui lòng nhập mã xác nhận vào ô bên dưới. Nếu bạn không đọc được, hãy Chọn mã xác nhận khác.. Đồng ý LAVA AANETWORK THÔNG TIN
  • Về chúng tôi
  • Quy định bảo mật
  • Thỏa thuận sử dụng
  • Quy chế hoạt động
TRỢ GIÚP
  • Hướng dẫn sử dụng
  • Upload tài liệu
  • Hỏi và đáp
HỖ TRỢ KHÁCH HÀNG
  • Liên hệ
  • Hỗ trợ trực tuyến
  • Liên hệ quảng cáo
Theo dõi chúng tôi

Chịu trách nhiệm nội dung:

Nguyễn Công Hà - Giám đốc Công ty TNHH TÀI LIỆU TRỰC TUYẾN VI NA

LIÊN HỆ

Địa chỉ: P402, 54A Nơ Trang Long, Phường 14, Q.Bình Thạnh, TP.HCM

Hotline: 093 303 0098

Email: support@tailieu.vn

Giấy phép Mạng Xã Hội số: 670/GP-BTTTT cấp ngày 30/11/2015 Copyright © 2022-2032 TaiLieu.VN. All rights reserved.

Đang xử lý... Đồng bộ tài khoản Login thành công! AMBIENT

Từ khóa » Trình Tự Axit Nucleic