Các Phương Pháp Xác định Vi Sinh Vật Trực Tiếp Bằng Buồng đếm Và ...

Trang chủ Tìm kiếm Trang chủ Tìm kiếm Bài thuyết trình: Các phương pháp xác định vi sinh vật trực tiếp bằng buồng đếm và gián tiếp bằng cách đếm khuẩn lạc pptx 27 3 MB 0 183 4 ( 3 lượt) Xem tài liệu Nhấn vào bên dưới để tải tài liệu Tải về Đang chuẩn bị: 60 Bắt đầu tải xuống Để tải xuống xem đầy đủ hãy nhấn vào bên trên Chủ đề liên quan Phương pháp xác định vi sinh vật trực tiếp Công nghệ thực phẩm Đếm khuẩn lạc Vi sinh vật trực tiếp Phương pháp đếm trực tiếp bằng buồng đếm Xác định vi sinh vật

Nội dung

BỘ CÔNG THƯƠNG TRƯỜNG ĐH CÔNG NGHIỆP THỰC PHẨM TP.HCM Khoa: CNSH & KTMT MÔN: VI SINH VẬT KỸ THUẬT MÔI TRƯỜNG ĐỀ TÀI: CÁC PHƯƠNG PHÁP XÁC ĐỊNH VI SINH VẬT TRỰC TIẾP BẰNG BUỒNG ĐẾM VÀ GIÁN TIẾP BẰNG CÁCH ĐẾM KHUẨN LẠC GVHD:Nguyễn Duy Thanh NHÓM: 4 04/21/2022 1 MỤC LỤC I II • Cơ sở lý thuyết • Cách tiến hành III • Ưu, nhược điểm của từng phương pháp IV • Tài liệu tham khảo 04/21/2022 VSV-N4 2 Mở đầu Trong bất kỳ một loại mẫu vật nào, muốn biết số lượng chung của các nhóm vi sinh vật cũng như số lượng riêng của mỗi nhóm thành phần, đều cần phải đếm số lượng tế bào của chúng. Để xác định số lượng vi sinh vật trong đất, nước, không khí và dịch nuôi cấy … người ta có thể sử dụng nhiều phương pháp khác nhau. 04/21/2022 VSV-N4 3 Mở đầu Trong đó có 2 phương pháp dưới đây được dùng nhiều hơn cả: • Phương pháp xác định trực tiếp số lượng tế bào bằng phiến kính có khung đếm Goriaep (phòng đếm hồng cầu). • Phương pháp xác định gián tiếp số lượng tế bào bằng cách đếm số lượng khuẩn lạc mọc trên môi trường thạch. 04/21/2022 VSV-N4 4 Phương pháp đếm trực tiếp bằng buồng đếm VSV-N4 04/21/2022 5 Cơ sở lý thuyết  Phương pháp đếm trực tiếp cho phép ta đếm số lượng vi sinh vật có kích thước lớn như nấm men, tảo  Đếm số lượng tế bào trực tiếp trên kính hiển vi, nhờ buồng đếm hồng cầu 04/21/2022 VSV-N4 6 Buồng đếm Hemocytometer VSV-N4 04/21/2022 7 Cấu tạo của buồng đếm VSV-N4 04/21/2022 8 Nguyên tắc cấu tạo của buồng đếm: Là một phiến kính dày hình chữ nhật, chia thành 3 khoảng, khoảng giữa chia thành 2 khoảng nhỏ. Trên mỗi khoảng này có kẻ một lưới đếm, gồm rất nhiều ô vuông . Mỗi ô vuông lại được chia ra thành 16 ô vuông nhỏ , mỗi ô nhỏ có diện tích là 1/400 mm2, và chiều dày là 1/10 mm, như vậy thể tích 1 ô vuông nhỏ là 1/4000 mm3 hay 1/4000.000 ml. Buồng đếm có 1 lá kính dày để đậy. 04/21/2022 VSV-N4 9 Cách tiến hành • Chuyển thể tích mẫu • Để mẫu vào buồng đếm • Đếm số lượng vi sinh vật • Kết quả đếm được tế bào/ml. 04/21/2022 VSV-N4 10 VSV-N4 04/21/2022 11 Sau khi cho lên kính hiển vi VSV-N4 04/21/2022 12 Cách đếm số lượng vi sinh vật VSV-N4 04/21/2022 13 • Cách đếm số tế bào trong mỗi ô lớn như sau: mỗi ô nhỏ có 4 cạnh giới hạn, đếm số lượng tế bào nằm trọn trong ô và những tế bào nằm trên 2 cạnh liên tiếp cùng chiều. • ví dụ: đếm cạnh bên dưới và cạnh bên phải. Đếm các ô từ trái sang phải, từ hàng trên xuống hàng dưới rồi đổi chiều. Cứ đếm như vậy cho đến ô cuối cùng của 16 ô con. 04/21/2022 VSV-N4 14 Cách tính toán • Gọi A là số lượng tế bào đếm được trong 80 ô nhỏ • Số lượng tế bào trong 1mm được tính theo công thức sau: 3 số tế bào trong 1mm3 • Trong đó: 4000 = 400*10 (1/400 mm : diện tích một ô nhỏ ; 1/10 mm: chiều cao từ mặt buồng đếm tới lammelle) 2 • APL : độ pha loãng VSV-N4 04/21/2022 15 Ưu và nhược điểm của phương pháp •Ưu điểm • Nhược điểm: : quá trình này cho phép •không phân biệt được tế bào sống và tế bào chết. •dễ nhầm lẫn tế bào vi sinh vật xác định nhanh chóng với các vật thể khác trong mẫu. •khó đạt được độ chính xác cao. •Không thích hợp với huyền mật độ vsv chứa trong phù vi sinh vật có mật độ thấp. mẫu. VSV-N4 04/21/2022 16 Phương pháp đếm khuẩn lạc 04/21/2022 17 Ưu điểm: • Cho phép xác định số tế bào sống • Định lượng chọn lọc vsv Phương pháp: • Chuẩn bị dịch pha loãng mẫu • Chuẩn bị các chuỗi pha loãng mẫu • Cấy mẫu vàomôi trường, ủ mẫu • Đếm số khuẩn lạc hình thành 04/21/2022 VSV-N4 18 Chuẩn bị các chuỗi pha loãng mẫu pha loãngmẫu lỏng theo dãy thập phân 0g mẫu + 90ml dung dịch pha loãng => độ pha loãng 04/21/2022 VSV-N4 19 Các thiết bị hỗ trợ đếm khuẩn lạc Máy đếm khuẩn lạc 04/21/2022 Máy đếm khuẩn Lạc tự động VSV-N4 20 Đếm khuẩn lạc • Đếm tất cả khuẩn lạc đơn lẻ mọc trên môi trường • Thường chọn những đĩa có số khuẩn lạc khoảng 30 – 300 • Dùng bút để đếm các khuẩn lạc đã đếm • Tính toán kết quả (dựa trên số khuẩn lạc đếm được và độ pha loãng để tính ra số khuẩn lạc vsv trong dung dịch ban đầu) 04/21/2022 VSV-N4 21 Khuẩn lạc vsvmọc trênmàng 1A 1B 2A 1D 1C 04/21/2022 E. coli trên môi trường ID Coli agar 2C VSV-N4 2B 2D Coliforms trên môi trường ID 22 Coli a Phương pháp hộp trải: • 0.1 ml dung dịch mẫu • Trên mặt môi trường của hộp petri • Dùng que gạt đều • Ủ ở điều kiện thích hợp • Đếm số khuẩn lạc : đơn vị CFU VSV-N4 04/21/2022 23 Phương pháp hộp trải Ưu điểm • Định lượng được các VSV nhạy nhiệt • Có thể nhận dạng đựơc dạng khuẩn lạc đặc trưng • Dễ dàng làm thuần chủng VSV mục tiêu Nhược điểm • Chỉ cấy đựơc thể tích mẫu nhỏ • Chỉ cho phép đếm được số lượng khuẩn lạc thấp 04/21/2022 VSV-N4 24 Phương pháp hộp đổ • Chuẩn bị đĩa petri vô trùng • Môi trường được chuẩn bị - hấp khử trùng và được bảo quản mát ở 45oC trong bể điều nhiệt • Hút 1ml mẫu vào đĩa trống (chọn nồng độ thích hợp) • Đổ vào đĩa đã cấy 10 – 15ml môi trường, lắc đều • Để nguội môi trường • Đem ủ • Đếm số khuẩn lạc 04/21/2022 VSV-N4 25 Phương pháp hộp đổ Ưu điểm • • • • • Cấy được thể tích mẫu lớn (1ml) Xác định được các VSV cần dinh dưỡng tiếp xúc từ nhiều phía Cho phép đếm được mật độ VSV cao, khoảng 150-300 khuẩn lạc Nhược điểm • • • • • Không định lượng được những VSV quá nhạy nhiệt Không xác định được hình dạng khuẩn lạc nhất định Khó làm thuầnmột dòng VSV 04/21/2022 VSV-N4 26 VSV-N4 04/21/2022 27 This site is protected by reCAPTCHA and the Google Privacy Policy and Terms of Service apply.

Tìm kiếm

Chủ đề

Bài tiểu luận mẫu Tài chính hành vi Mẫu sơ yếu lý lịch Atlat Địa lí Việt Nam Đồ án tốt nghiệp Thực hành Excel Đề thi mẫu TOEIC Đơn xin việc Lý thuyết Dow Hóa học 11 Trắc nghiệm Sinh 12 Giải phẫu sinh lý adblock ​ Bạn đang sử dụng trình chặn quảng cáo?

Nếu không có thu nhập từ quảng cáo, chúng tôi không thể tiếp tục tài trợ cho việc tạo nội dung cho bạn.

Tôi hiểu và đã tắt chặn quảng cáo cho trang web này